No Brasil, a cocirculação de diferentes arbovírus reforça a necessidade do desenvolvimento de protocolos de diagnóstico molecular rápidos, específi cos, sensíveis e que permitam a detecção, sempre que possível, de mais de um arbovírus na mesma reação. Dentre os protocolos de amplificação do genoma viral, as técnicas em tempo real apresentam vantagens neste contexto, principalmente quando utilizam sondas marcadas com fluoróforos. Sobre a técnica supracitada, avalie se são verdadeiras (V) ou falsas (F) as afirmativas a seguir:

I. As sondas são marcadas com uma molécula que emite fluorescência (quencher) numa extremidade e com uma molécula que absorve a fluorescência (reporter) na outra extremidade.

II. Em um protocolo para alvos múltiplos (multiplex) numa mesma reação, as sondas específi cas para cada sequência genômica poderão ser marcadas com a mesma molécula repórter, necessitando somente de moléculas quencher distintas.

III. Durante o desenho dos oligonucleotídeos, a região de hibridização da sonda deve estar localizada à montante da região de hibridização do primer sense (forward).

As afirmativas I, II e III são, respectivamente:

Durante o desenvolvimento de um ensaio de RT-PCR em tempo real e RT-LAMP, é imprescindível entender o princípio das técnicas para a escolha da DNA polimerase adequada. Assim, é correto afirmar que:

As publicações científicas sobre a técnica de amplificação isotérmica mediada por loop aumentaram durante o período da pandemia por COVID-19. Um dos motivos foi a aplicação da estratégia como alternativa para a amplificação do ácido nucleico do SARS-CoV-2. Sobre a técnica é correto afirmar que:

Durante o desenvolvimento de um protocolo de PCR, o desenho dos oligonucleotídeos iniciadores (primers) é uma etapa crucial para o sucesso do mesmo. Por isso, alguns critérios devem ser considerados. Sobre os critérios, avalie se são verdadeiras (V) ou falsas (F) as afirmativas a seguir:

I. A porcentagem recomendada do conteúdo GC é de 40% a 60%.
II. A terminação 3’ deve ser rica em AT.
III. Repetições de bases invertidas ou sequências auto complementares são recomendadas.

As afirmativas I, II e III são, respectivamente:

Protocolos genéricos para a detecção dos genomas dos alphavírus e flavivírus seriam recomendados para amostras suspeitas, respectivamente, de:

Um paciente internado com sintomas compatíveis para febre amarela há três dias, teve uma amostra de sangue coletada e encaminhada para o setor de diagnóstico laboratorial. Das opções abaixo, aquela que descreve, respectivamente, o “exame” e “material utilizado” mais apropriado e capaz de gerar resultado com maior rapidez é:

Observe as afirmativas a seguir, em relação à manutenção das culturas de células para o isolamento viral de arbovírus:

I. Todas as linhagens celulares necessitam de incubação em atmosfera com 5% de CO2.
II. A temperatura de 37°C é apropriada para a VERO.
III. No preparo de meio de crescimento é recomendado acrescentar soro fetal bovino para uma concentração final de 2%.

Sobre as afirmativas acima, pode-se dizer que:

O diagnóstico dos arbovírus através do isolamento viral em cultura celular permite confirmar a presença de vírion, oriundo da amostra clínica inoculada. Como sistema de isolamento viral, utiliza-se linhagens de células de vertebrado e de invertebrado. O nome e a origem da linhagem celular de invertebrado recomendada para a técnica é:

Os vírus Chikungunya e Zika (zikaense) foram emergentes no Brasil desde 2014, causaram epidemias em várias regiões. De acordo com a taxonomia viral eles pertencem às famílias, respectivamente:

A família Flaviviridae possui um gênero denominado Orthoflavivirus, que possui várias espécies no grupo dos arbovírus. São transmitidos por vetores culicídeos, dentre os vírus que estão relacionados a seguir, é correto afirmar que NÃO pertence à família Flaviviridae :