A análise de polimorfismo de comprimento de fragmento de restrição terminal (T- RFLP) é uma técnica molecular muito útil na identificação de espécies microbianas e suas cepas.

Sobre essa metodologia, assinale com V as afirmativas verdadeiras e com F as falsas.

(   ) Na metodologia T- RFLP, um gene alvo é amplificado por PCR, e o produto dessa reação é tratado com enzimas de restrição que corta o DNA em regiões específicas. Isso gera uma série de fragmentos de DNA de comprimento variável, cujo número depende de quantos cortes para enzima de restrição estão presentes nessa sequência amplificada.
(   ) A clivagem de amostras diferentes por uma mesma enzima de restrição pode gerar um conjunto de fragmentos de tamanhos diferentes.
(   ) Na amplificação do DNA alvo pelo método de PCR, são utilizados iniciadores marcados com corantes fluorescentes. Após a ação das enzimas de restrição, os fragmentos com a extremidade terminal marcada por fluorescência são separados por eletroforese em gel e dimensionados em um sequenciador de DNA automatizado.
(   ) Essa técnica permite a identificação de diferentes microrganismos e suas cepas, entretanto não fornece informações sobre a diversidade populacional de uma comunidade bacteriana.

Assinale a sequência correta.

Dentre os métodos moleculares mais utilizados na rotina laboratorial, a PCR (reação em cadeia de polimerase) tem ganhado destaque.

Sobre a técnica de PCR e suas variações, assinale com V as afirmativas verdadeiras e com F as falsas.

(   ) A PCR convencional consiste em um método de amplificação de um fragmento de DNA específico. Essa especificidade é conferida ao teste pela utilização de iniciadores que devem reconhecer apenas o DNA do microrganismo pesquisado, não se ligando ao DNA humano, também presente na amostra. Ao término dos ciclos de PCR, o fragmento amplificado deve ser identificado por eletroforese em gel de agarose ou de poliacrilamida.
(   ) A RT-PCR é uma variação da PCR convencional. Nessa técnica, moléculas de RNA são convertidas a cDNA por uma enzima chamada de transcriptase reversa. As moléculas de cDNA assim produzidas são submetidas aos ciclos de amplificação da PCR. O cDNA, apesar de produzido a partir de um RNA, é igual ao DNA gênomico.
(   ) A PCRq é outra variação da PCR convencional. Nessa técnica, o processo de amplificação do fragmento de DNA alvo é visualidade em tempo real pela emissão de fluorescência que é liberada a cada fita nova de DNA formada. Essa metodologia permite ensaios qualitativos e quantitativos.
(   ) Existem duas estratégias para a emissão de fluorescência no teste PCRq: em uma se utiliza o corante SYBR green e em outra são utilizadas sondas fluorescentes. A primeira estratégia é mais específica que a segunda, pois o corante SYBR green é gene-específico, isto é, se liga apenas ao DNA alvo.

Assinale a sequência correta.

Muitos meios diferenciais incorporam testes bioquímicos que avaliam a presença ou ausência de enzimas envolvidas no catabolismo de um ou mais substratos específicos. Centenas de ensaios bioquímicos diferenciais são conhecidos, mas apenas cerca de 20 são utilizados rotineiramente.

Sobre esse tema, assinale a alternativa incorreta.

Para o isolamento e identificação de organismos clinicamente relevantes, o espécime deve ser obtido e manipulado corretamente de forma a garantir a sobrevivência dos patógenos.

Sobre esse tema, assinale a alternativa correta.

Testes rápidos, também designados como testes de pronto atendimento, ganharam espaço na prática clínica pela sua simplicidade. São testes de fácil execução cuja resposta é liberada em alguns poucos minutos.

Com relação a esses testes, é incorreto afirmar:

Ensaio imunoenzimático (EIA) ou ensaio de imunoabsorção ligado a enzimas (ELISA) é uma técnica imunológica muito sensível e específica, amplamente utilizada na clínica e em pesquisas. O EIA possui quatro variações: direto, indireto, sanduíche e de combinação.

Assinale a alternativa que apresenta a definição correta dessa técnica.

A aglutinação é uma reação entre anticorpo e um antígeno particulado, resultando em uma aglomeração de partículas visíveis.

Sobre esse imunoensaio, assinale com V as afirmativas verdadeiras e com F as falsa.

(   ) A aglutinação direta ocorre quando anticorpos solúveis promovem a formação de agregados em decorrência de sua interação com um antígeno.
(   ) A aglutinação passiva ocorre quando antígenos ou anticorpos são adsorvidos ou quimicamente acoplados a partículas insolúveis como esfera de látex ou partículas de carvão vegetal.
(   ) As reações de aglutinação direta podem ser até cinco vezes mais sensíveis que os testes de aglutinação passiva.
(   ) Vários ensaios utilizando esfera de látex foram desenvolvidos para diferentes patógenos tais como Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes, Neisseria gonorrhoeae, Candida albicans, entre outros.

Assinale a sequência correta.

A titulação é uma técnica utilizada para mensurar a quantidade de anticorpos circulantes produzidos contra antígenos de um patógeno suspeito.

Sobre essa técnica e sua interpretação clínica, assinale a alternativa incorreta.

Um meio de cultura é uma solução nutriente utilizada para promover o crescimento de microrganismos. São muito utilizados na prática laboratorial e importantes para o estudo detalhado desses seres.

Com relação aos meios de cultura, assinale com V as definições verdadeiras e com F as falsas.

(   ) Os meios definidos são preparados pela adição de quantidades precisas de compostos químicos inorgânicos à água destilada. Compostos orgânicos não são adicionados. A composição química exata de um meio definido é conhecida.
(   ) Os meios complexos empregam componentes de produtos microbianos, animais ou vegetais e a composição exata desses componentes não é essencial, ou seja, sua composição nutricional não é precisamente conhecida. Compostos orgânicos são adicionados e a natureza da fonte de carbono e sua concentração dependem do organismo a ser cultivado.
(   ) Os meios enriquecidos são meios definidos suplementados com substâncias adicionais altamente nutritivas como soro ou sangue. São meios ideais para o crescimento de microrganismos nutricionalmente exigentes, muitos dos quais são patógenos.
(   ) O meio seletivo contém compostos que inibem seletivamente o crescimento de alguns microrganismos, mas não de outros.
(   ) O meio diferencial corresponde àquele ao qual um indicador, normalmente um corante, é adicionado, revelando por meio de mudança de coloração se uma reação metabólica em particular aconteceu durante o crescimento do microrganismo.

Assinale a sequência correta.

Releia o trecho a seguir.

“Eles são um dos principais dispositivos que a humanidade dispõe para transmissão de conhecimento ao longo de gerações”.

Assinale a alternativa cuja correção esteja adequada à norma-padrão e não altere o sentido do texto original.