Para a confecção do esfregaço, o sangue deve ser colhido com EDTA e, em seguida, uma gota deve ser colocada na extremidade da lâmina e espalhada em um ângulo de 45 graus.

Para a preparação do esfregaço, primeiro o sangue é colocado em uma das extremidades da lâmina, logo em seguida é realizado o esfregaço para espalhar o mesmo. O ideal é que a lâmina de cima seja colocada com um angulo de 45 graus, o que dará uma camada mais delgada ao material.

A gota de sangue para o esfregaço não deve ser muito grande. Quanto maior a gota, tanto mais espesso será o esfregaço.