Em caso de combinação de dois tipos de insulina, aspirar antes a insulina de ação intermediária (regular) para que o frasco não se contamine com a insulina de ação curta (NPH); não é necessário limpar o local de aplicação com álcool.

Lavar as mãos com água e sabão antes da preparação da insulina; o frasco de insulina deve ser rolado gentilmente entre as mãos para misturá-la, antes de aspirar seu conteúdo.

O local deve ser pinçado levemente entre dois dedos e a agulha deve ser introduzida completamente, em ângulo de 90 graus; em crianças ou indivíduos muito magros esta técnica pode resultar em aplicação intramuscular, com absorção mais lenta da insulina. Nestes casos podem-se utilizar agulhas mais curtas ou ângulo de 15 graus.

Puxar o êmbolo para verificar a presença de sangue; esperar cinco segundos após a aplicação antes de se retirar a agulha do subcutâneo, para garantir injeção de toda a dose de insulina.