A síntese de DNA ocorre no sentido 3' → 5', pois a enzima DNA polimerase necessita de uma extremidade 5' livre para adicionar novos nucleotídeos.

A DNA polimerase inicia a síntese de DNA diretamente sobre a fita molde e adiciona nucleotídeos na extremidade 5' da cadeia em crescimento.

A DNA polimerase reconhece erros durante a replicação, mas não possui capacidade de removê-los, sendo essa função exclusiva de outras enzimas do sistema replicativo.

A replicação semiconservativa caracteriza-se pela formação de duas moléculas-filhas compostas apenas por cadeias recém-sintetizadas.

A DNA polimerase adiciona nucleotídeos na extremidade 3' da cadeia em formação, razão pela qual a síntese da nova fita ocorre no sentido 5' → 3'.