utiliza marcação radioativa diretamente no DNA a ser sequenciado.

incorpora os reagentes padrões para uma técnica de PCR, com a adição em tubos isolados dos respectivos didesoxinucleotídeo (ddNTP).

o DNA fita dupla não precisa ser desnaturado.

não necessita de solução tampão.

após o término de um ciclo de PCR, um fragmento de DNA de tamanho distinto poderia ser formado, e essa variação ocorre independentemente da incorporação de um ddNTP ou de um desoxinucleotídeo (dNTP).