No modo de eluição isocrática, diminuindo-se gradativamente a polaridade da fase móvel o tempo de retenção dos analitos polares aumenta.

A fase móvel é mais polar que a fase estacionária. O tempo de retenção dos analitos polares será maior que dos analitos apolares.

A fase estacionária é menos polar que a fase móvel. No processo de separação dos componentes da amostra analitos apolares terão um tempo de retenção maior que dos analitos polares.

No modo de eluição isocrática a fase móvel é inicialmente polar, favorecendo a interação com a fase estacionária apolar. Durante a análise cromatográfica diminui-se gradativamente a polaridade da fase móvel, aumentando o tempo de retenção dos analitos apolares.

Quanto mais polares forem as moléculas da fase móvel, menor será o tempo de retenção dos analitos apolares.