as bactérias gram-positivas possuem uma parede fina de peptidoglicano e pequena quantidade de ácido teicóico

quanto mais espessa é a parede bacteriana formada de peptidoglicano e ácido teicóico, mais retém o cristal violeta

a descoloração do cristal violeta é feita através do álcool-ácido

a última etapa do método é cobrir o esfregaço com lugol, que serve como mordente