Esse método separa as bactérias existentes em dois grupos: bactérias gram-positivas, que se coram em azul e as bactérias gram-negativas, que se coram em vermelho.

São necessárias aproximadamente 100.000 bactérias/mL para que se possa visualizar uma bactéria por campo de microscopia, utilizando óleo de imersão (objetivas de 100X).

As amostras de sangue de pacientes são submetidas de forma direta ao método Gram.

A coloração de Gram envolve um procedimento realizado em quatro etapas.

Na primeira etapa, o corante cristal violeta cora todas as células em azul/púrpura.