a separação de espermatozoides usando um gradiente de densidade depende da densidade do plasma seminal.

os espermatozoides maduros e morfologicamente normais têm densidade < 1,05 em comparação com espermatozoides imaturos e/ou anormais, que têm densidades entre 1,06 e 1,09 g/mL.

os espermatozoides de diferentes densidades podemser separados pela distância que conseguem percorrer através de um gradiente de densidade.

essa técnica baseia-se no fato de que partículas de densidade específica sedimentam até atingirem o ponto em que sua densidade é 10x maior que a do meio do gradiente.

um gradiente é preparado em um tubo usando camadas de densidades diferentes, é colocado 1 mililitro da concentração do meio de gradiente de densidade alta sobre 1 mililitro do meio de gradiente de densidade baixa em um tubo cônico.