os ensaios de terceira geração são denominados sanduíche ou imunométrico, pois todas as classes de anticorpos anti- HIV (IgG, IgM e IgA) são detectadas.

segundo a legislação hemoterápica, é obrigatória a realização de exames laboratoriais de alta sensibilidade a cada doação para triagem laboratorial de doenças transmissíveis.

nos ensaios Imunoenzimáticos, a presença ou ausência de anticorpos anti-HIV-1 e (ou) HIV-2 ou de antígenos é determinada pela intensidade de luz obtida numa amostra.

nos ensaios de quarta geração, além da detecção de todas as classes de anticorpos anti-HIV (IgG, IgM e IgA), também é identificado o antígeno p24.

na fase sólida dos ensaios de quarta geração, estão fixados os anticorpos contra o antígeno p24 e antígenos (proteínas) do HIV-1 (como as proteínas gp160, gp120 e gp41), antígenos do grupo O e antígenos de HIV-2.