São utilizados apenas os corantes: Cristal de violeta e Lugol.

A precipitação de corantes geralmente se assemelha a formas cocoides gram-negativas.

Muco e outros materiais proteicos podem ser confundidos com bastonetes gram-positivos.

Todo o esfregaço, antes de ser submetido à coloração, deverá estar seco (exposto ao ar), sendo fixado com calor médio (75°C).

Os esfregaços devem ser preparados com um gradiente de espessura suficientemente denso para facilitar a visualização, mas, também, bastante esparso para revelar as características dos agrupamentos.