O ciclo de Krebs é constituído por nove reações catalisadas por enzimas específicas, nas quais o ácido oxalacético é consumido na primeira reação, exigindo sua síntese ao final de cada ciclo para que o processo metabólico continue.

Ao final de cada volta do ciclo de Krebs, ocorre a liberação de dois carbonos do ácido cítrico na forma de CO₂, com produção de energia suficiente para a formação de um ATP (a partir de GTP), três NADH e uma FADH₂.

Cada molécula de glicose, ao ser completamente processada no ciclo de Krebs, origina uma volta do ciclo, produzindo um ATP, três NADH e uma FADH₂, correspondentes à formação de uma molécula de acetil-CoA.

A enzima succinato-desidrogenase transfere hidrogênios do substrato diretamente para o NAD⁺, encontrando-se dissolvida na matriz mitocondrial e atuando de modo independente da cadeia respiratória.

Em todas as reações do ciclo de Krebs que geram NADH, os substratos oxidados cedem H⁻, não ocorrendo liberação de H⁺ associada à primeira e à terceira moléculas de NADH produzidas.