Um bioquímico está desenvolvendo um método analítico para quantificar um novo fármaco em plasma, utilizando a espectrofotometria UV-Vis. Para isso, ele prepara uma série de soluções-padrões em concentrações crescentes. Ao plotar a curva de calibração (absorbância versus concentração) no gráfico, ele observa que, nas concentrações mais baixas, a relação é linear, mas, em concentrações muito altas, o gráfico apresenta uma curvatura para baixo.

Qual dos seguintes princípios teóricos da espectrofotometria melhor explica essa observação e qual seria a medida correta para o toxicologista garantir a validade da sua análise?