Uma pesquisadora precisa adquirir imagens de alta resolução em diferentes amostras para fazer a análise ultraestrutural de mitocôndrias em cortes ultrafinos de tecido hepático. Ao trocar as amostras no microscópio eletrônico de varredura, ela percebe que o tecido observado está fora de foco, e os comandos de ajuste não resolvem o problema.

Nesse contexto, assinale a alternativa que explica corretamente a causa do problema e apresenta a melhor solução.

Durante uma sessão microscopia eletrônica de transmissão para a análise ultraestrutural de um tecido animal, o microscopista observa que as mitocôndrias aparecem alongadas somente em uma direção. Ao tentar ajustar o foco, percebe que a imagem melhora em uma direção, mas piora na direção perpendicular à anterior. Mesmo após várias tentativas de focagem e mudanças na magnificação, as mitocôndrias nunca ficam perfeitas e a nitidez da imagem permanece desigual.

Com base nessa situação, assinale a alternativa que melhor explica o problema e sua respectiva solução.

Um dos artefatos produzidos pelo processo ultramicrotomia é a compressão das secções cortadas. Nesse processo ocorre a alteração da forma e prejudica a qualidade da imagem.

São procedimentos que evitam a produção desse artefato, exceto:

Durante uma investigação sobre a localização subcelular de um receptor de membrana em células epiteliais infectadas, uma equipe optou por usar a técnica CLEM (Microscopia Correlativa de Luz e Elétrons). Após a marcação com anticorpos fluorescentes e a captura de imagens por microscopia de fluorescência, as células foram preparadas para observação em microscopia eletrônica de transmissão.

Com base nesse cenário, qual das alternativas a seguir apresenta uma justificativa adequada para o uso da CLEM nesse experimento?

A técnica de imunolocalização de Tokuyasu é amplamente utilizada em estudos de microscopia eletrônica de transmissão por permitir a visualização precisa de antígenos (ou proteínas de interesse) em tecidos e células.

Assinale a alternativa que descreve corretamente as etapas do protocolo dessa técnica.

Um professor de virologia apresenta duas amostras diferentes para serem preparadas para um estudo utilizando microscopia eletrônica de transmissão. A primeira amostra deve ser preparada de modo a localizar uma proteína viral específica em células infectadas, e a segunda, para um estudo ultraestrutural detalhado.

Com base nas características e aplicações das resinas utilizadas em microscopia eletrônica de transmissão, assinale a alternativa que apresenta a escolha mais adequada para cada amostra.

LR White® é uma resina que pode ser utilizada na inclusão de tecidos para microscopia eletrônica de transmissão. Sua baixa viscosidade e natureza hidrofílica permitem rápida infiltração e incorporação no tecido, assim como o carreamento de moléculas que podem ser usadas na identificação de ultraestruturas.

Dentre as opções a seguir, em qual área de aplicação essa resina é recomendada?

Apesar do alto poder de resolução dos microscópios eletrônicos, amostras biológicas muitas vezes apresentavam artefatos ou estruturas mal definidas, o que dificultava a interpretação dos dados. Por essa razão, um protocolo de preparo de amostras que permite preservar as estruturas celulares com maior fidelidade, evitando alterações durante o processo de análise, foi desenvolvido. Essa metodologia se mostrou capaz de preservar as ultraestruturas de tecidos e células para observação em microscopia eletrônica de transmissão, tornando-se um procedimento-padrão nos laboratórios de todo o mundo.

Com base no texto, assinale a alternativa que apresenta a ordem correta de aplicação da metodologia desenvolvida para a melhoria da qualidade das imagens obtidas por microscopia eletrônica de transmissão.

No início dos anos 1970, os pesquisadores na área de morfologia enfrentavam dificuldades em obter imagens ultraestruturais nítidas de tecido neural usando a microscopia eletrônica de transmissão, pois a maioria das amostras apresentava alterações morfológicas significativas, que comprometiam a interpretação dos dados. Um método experimental, então, foi desenvolvido, e o resultado obtido foi notável: as organelas mantinham sua integridade, as sinapses podiam ser analisadas com clareza e os artefatos de fixação foram drasticamente reduzidos.

A que metodologia o texto se refere?

Durante a análise de amostra não condutora, mas submetida ao revestimento com material condutor, obteve-se imagem com grande diferença de brilho e presença de linhas e distorções, como exemplificado a seguir (imagem da esquerda).

Legenda: Imagens de mesma região da amostra de cerâmica adquiridas a partir de elétrons secundários com efeitos negativos (imagem da esquerda) e com melhoria da qualidade (imagem da direita) da imagem.

Disponível em: https://www.jeol.com/words/semterms/20121024.054158.php#gsc.tab=0. Acesso em: 16 jun. 2025.

Dentre as opções a seguir, qual deve ser utilizada para minimizar esses efeitos negativos e, assim, melhorar a qualidade da imagem?