A maioria dos métodos de diagnóstico em bacteriologia explora as características fenotípicas das bactérias, que são de grande valia nos estudos etiológicos, mas de valor limitado para interpretações filogenéticas. Considerando os princípios e os métodos de diagnóstico em bacteriologia, assinale a opção incorreta.

Vários métodos são empregados na identificação de bactérias envolvidas na etiologia de doenças de humanos, de outros animais e de plantas, bem como no estudo de bactérias de interesse ambiental e industrial. Esses métodos variam desde a observação de aspectos culturais e morfológicos das bactérias, passando por testes de sensibilidade às condições do ambiente físico e químico, testes bioquímicos, testes imunológicos, até as ferramentas modernas da biologia molecular. Apesar de serem de grande praticidade e precisão, por questões econômicas e da escassez de mão-de-obra especializada, as técnicas de biologia molecular ainda são de uso restrito no Brasil. Com isso, métodos antigos continuam sendo de uso corrente na diagnose em bacteriologia. Julgue os itens subseqüentes, considerando os vários métodos de diagnóstico em bacteriologia.

I Para as bactérias que se desenvolvem em meio de cultura, o primeiro passo para a sua identificação é o seu isolamento em cultura pura.

II Após o isolamento em cultura pura, a bactéria deve ser estudada quanto às suas características morfológicas e fisiológicas, incluindo: sensibilidade a temperaturas elevadas; tolerância a oxigênio; tolerância a vários íons e compostos; características metabólicas e exigências nutricionais.

III De posse das características gerais da bactéria, essas informações podem ser comparadas às de táxons bacterianos já descritos.

IV Para bactérias fastidiosas, que não se desenvolvem ou apresentam crescimento muito lento em meios de cultura, a diagnose é dificultada, já que estas nem sempre ocorrem dissociadas da presença de outras bactérias. Nesse caso, o diagnóstico pode ser auxiliado pela adoção de métodos diretos, como os sorológicos, os histoquímicos, os imunocitoquímicos e os de biologia molecular.

V Quando se comparam as características de determinada bactéria entre espécies, é necessário que se comparem tais características entre múltiplas linhagens, uma vez que, dentro de uma mesma espécie de bactéria, pode existir considerável diversidade genética.

A quantidade de itens certos é igual a

Principalmente na fase final de crescimento, os fungos produzem vários compostos que não estão diretamente envolvidos com o seu desenvolvimento normal. Julgue os itens abaixo, considerando a síntese e as funções dos produtos do metabolismo secundário em fungos.

I O metabolismo secundário é considerado uma válvula de escape para remover produtos intermediários do metabolismo quando o crescimento do fungo passa a ser restringido.

II O antibiótico penicilina produzido por espécies de Penicillium garante ao fungo total proteção territorial contra a invasão de bactérias, já que estas são incapazes de degradar o antibiótico.

III Substâncias odoríferas típicas de alguns fungos atraem insetos que contribuem para a dispersão de esporos.

IV Em fungos de coloração escura, o acúmulo de melanina está relacionado à proteção do fungo contra a ação de raios ultravioleta.

V As aflatoxinas, substâncias cancerígenas, são produzidas por espécies fúngicas do gênero Aspergillus que apresentam como via biossintética a do ácido chiquímico.

Estão certos apenas os itens

A energia resultante da quebra de compostos químicos e armazenada sobre a forma de ATP, GTP ou UDP é utilizada pelos micróbios para sintetizar várias classes de compostos essenciais à suas vidas. Julgue os itens seguintes, considerando a biossíntese de aminoácidos, proteínas e ácidos nucléicos pelos micróbios.

I Bactérias como a Escherichia coli podem sintetizar vários aminoácidos por um processo denominado transaminação, que consiste na transferência do grupo amino (-NH2) de um aminoácido para um dos ácidos do ciclo do ácido cítrico.

II Todos os micróbios necessitam de uma fonte de nitrogênio orgânico para a síntese de aminoácidos precursores de ácidos nucléicos e de proteínas.

III Como o organismo necessita de grande diversidade de aminoácidos para a síntese de proteínas, a produção de determinado aminoácido é regulada por um processo denominado feedback negativo.

IV A biossíntese de proteínas é feita seguindo o código genético estabelecido no m-ARN, em combinação com o código complementar do t-ARN, que transporta os resíduos de aminoácidos, os quais se ligam para formar uma molécula de proteína, processo este que se completa sem o consumo de energia.

V Para a biossíntese de nucleotídeos de purinas, além do açúcar ribose fosfato, faz-se necessária uma molécula do aminoácido ácido aspártico, para a síntese de adenosina monofosfato (AMP), e de uma molécula do aminoácido glutamina, para a síntese de guanosina monofosfato (GMP).

Estão certos apenas os itens

Os organismos quimiotróficos se valem da quebra de compostos químicos para a produção de energia sob a forma de ATP. Eles também dependem da quebra desses compostos para a obtenção de precursores para a síntese de aminoácidos, proteínas, lipídios, polissacarídeos e ácidos nucléicos. Julgue os próximos itens, considerando os sistemas catabólicos microbianos.

I Para completar a glicólise, duas moléculas de ATP são consumidas, porém outras quatro moléculas de ATP são geradas durante a transformação de uma molécula de glicose para duas moléculas de ácido pirúvico.

II Na glicólise, após a clivagem da frutose-1,6-difosfato em duas moléculas de gliceraldeído-3-fosfato, duas moléculas da coenzima nicotinamida adenina dinucleotídeo (NAD) oxidam as duas moléculas de gliceraldeído-3-fosfato a ácido-1,3-difosfoglicérico.

III Organismos como leveduras, quando crescem em condições anaeróbias, transformam o ácido pirúvico, produto final da glicólise, em álcool etílico. Já algumas bactérias são capazes de transformar o ácido pirúvico em ácido lático.

IV Na presença de oxigênio, a partir de uma molécula de glicose, as leveduras podem gerar 38 moléculas de ATP, sendo quatro da glicólise e 34 resultantes do ciclo do ácido cítrico.

V Para os micróbios, a fermentação pode constituir uma desvantagem, pois, além de os produtos da fermentação serem tóxicos, a grande quantidade de energia retida nesses produtos não é aproveitada pelo organismo.

A quantidade de itens certos é igual a

Para realizar atividades vitais, a célula microbiana requer um fluxo contínuo de energia, incluindo: biossíntese de componentes estruturais, como parede celular e membranas; síntese de aminoácidos, ácidos nucléicos e fosfolipídios; reparo e manutenção da célula; armazenamento de nutrientes e excreção de resíduos indesejáveis; desenvolvimento e reprodução; mobilidade e dispersão. Acerca da obtenção e utilização de energia pelos micróbios, assinale a opção correta.

Considerando os princípios e as aplicações da microscopia na microbiologia, julgue os itens subseqüentes.

I Com as técnicas de imunofluorescência, o microscópio confocal possibilita a observação de seções virtuais de células vivas, dispensando-se assim as etapas de morte, fixação, elaboração de seções ultrafinas e uso de corantes.

II O microscópio eletrônico possibilita melhor resolução por usar feixes de elétrons, equivalente ao aproveitamento de radiações entre 0,005 nm e 0,0003 nm, como também pelo uso de objetivas eletromagnéticas.

III O microscópio eletrônico de varredura permite a observação, com clareza, de organelas no interior de células intactas que não poderiam ser visualizadas com detalhes ao microscópio de luz.

IV Anticorpos conjugados com partículas de ouro coloidal podem ser usados na marcação de superfícies de estruturas antigênicas que podem ser visualizadas ao microscópio eletrônico de transmissão. Nas imagens, essas estruturas aparecem circundadas por pontos eletrodensos correspondentes às partículas de ouro.

V Para a observação, ao microscópio eletrônico de transmissão, da superfície de células bacterianas e de esporos fúngicos, faz-se necessária a cobertura do espécime por meio da evaporação da liga metálica ouro-paládio.

Estão certos apenas os itens

O sistema métrico é adotado na medição de espécimes e estruturas observadas ao microscópio, e o micrômetro (!$ \mu !$m) e a unidade utilizada com maior freqüência (1 !$ \mu !$m equivale à milésima parte de 1 mm). Assinale a opção que corresponde aos limites de resolução, em !$ \mu !$m, do microscópio óptico e do microscópio eletrônico, respectivamente.

Considere que o responsável pela montagem de um laboratório de microbiologia deverá decidir sobre a aquisição de microscópio de luz e de acessórios de microscopia e que não há limitação orçamentária. Em face dessas considerações, julgue os itens a seguir, considerando, ainda, a qualidade e a adequação dos equipamentos.

I Para a observação e manipulação de culturas vivas, o correto é adquirir um microscópio de objetivas invertidas.

II Um sistema dotado de contraste de interferência seria a melhor opção para a observação de estruturas dotadas de capacidade de emissão de fluorescência.

III Para boa visualização de células bacterianas submetidas a teste de coloração de Gram, o correto é comprar um microscópio de campo claro.

IV Para maximizar o poder de resolução do microscópio de campo claro, deve-se optar por objetiva de menor número de abertura e um sistema de filtros para selecionar a faixa de luz verde.

V Para a observação de células quase transparentes em material vivo, o correto é adquirir um microscópio de campo escuro.

Estão certos apenas os itens

Desde as observações de Antony van Leeuwenhoek (1632-1723) aos dias atuais, o microscópio tem sido ferramenta valiosa no entendimento do universo microbiano. Ao longo de sua evolução, a aplicação dos princípios da física, da matemática, da química, da biologia e, mais recentemente, dos recursos da informática, tem contribuído para a eliminação de artefatos, beneficiando a fidelidade das observações. Julgue os itens a seguir, acerca dos princípios e de outros elementos da microscopia de luz.

I Um objeto observado em um microscópio óptico composto é aumentado por dois conjuntos de lentes: o da objetiva, que amplia a imagem do objeto (imagem virtual) e projetá-a sobre o plano focal da ocular; a ocular, que, por sua vez, projeta uma imagem real ampliada que é visualizada pelo olho do microscopista.

II O aumento observado na ocular de um microscópio óptico composto pode ser calculado multiplicando-se o valor do aumento da objetiva pelo valor do aumento da ocular, o que corresponde ao mesmo aumento do tamanho do objeto impressionado em uma chapa de filme em uma câmera fotográfica montada no mesmo microscópio.

III Um maior poder de resolução de um microscópio óptico composto é alcançado com a combinação de oculares e objetivas de maior capacidade de aumento.

IV A objetiva de maior aumento (100X) é também a mais longa e portanto a de menor distância de trabalho, havendo a necessidade do uso de óleo de imersão para reduzir a perda de raios luminosos devido aos efeitos da difração.

V Em um microscópio óptico composto, a função da lente condensadora é a de contribuir para que a objetiva alcance o máximo da abertura numérica e, conseqüentemente, um maior poder de resolução.

Estão certos apenas os itens