O objetivo do PCR é fabricar quantidade suficiente da região de interesse do DNA, de modo que essa possa ser analisada e utilizada de acordo com foco da pesquisa. Nessa técnica, é necessário o uso de primers, após a desnaturação do DNA, processo este representado pelo número

Em análises citométricas, os protocolos de marcação intracelular são acompanhados de etapas de fixação. Para a fixação, são utilizados agentes que apresentam características importantes para a aplicação em citometria. Dessa forma, o fixador mais utilizado em citometria tem como seus principais alvos os grupos amino em aminoácidos de proteínas e nas bases de ácidos nucleicos, sendo também um bom fixador de lipídios que não altera os grupamentos funcionais de glicoproteínas de superfície celular. Trata-se de

Os métodos tradicionais para detecção de cistos de Giardia lamblia envolvem procedimentos para concentração e posterior visualização dos cistos por microscopia convencional, sendo, portanto, muito demorados. O uso de citometria de fluxo para essa finalidade é mais eficiente e rápido. Para isso, é feita a marcação das amostras com anticorpo monoclonal específico para o parasito e é utilizado Iodeto de Propídeo (PI). Esse teste possibilita a detecção do cisto do parasito nas amostras, como também a detecção da viabilidade das amostras, conforme ilustração a seguir.

A detecção pode ser realizada a partir de uma marcação com anticorpos monoclonais para moléculas de superfície desse parasito, e a avaliação da viabilidade, pode ser realizada com o marcador de morte celular representado por PI.

Os termos destacados estão indicados, respectivamente, pelos números da ilustração:

As análises por citometria feitas em um citômetro envolvem o sistema óptico que consiste em componentes de excitação e coleta. Esses componentes de excitação e coleta são representados, respectivamente, por

O sistema fluídico de um citômetro transporta as partículas (células humanas, por exemplo) a serem analisadas em um fluxo contínuo em direção ao ponto de interrogação do laser. Há, ainda, um outro fluido, geralmente uma solução tampão (sheath fluid), que envolve o núcleo onde passa a amostra na célula de fluxo. Na ilustração a seguir estão representadas as partes citadas.

Considerando as informações e a ilustração, sheat fluid, célula de fluxo, ponto de interrogação do laser e amostra são representados, respectivamente, pelos números

O sorting é um processo que tem aplicação de grande importância e destaque na citometria de fluxo e é realizado por citômetros específicos denominados Cell Sorters. O sorting tem uma ampla aplicação no estudo de culturas celulares, sendo uma de suas finalidades

As variações na sequência de DNA de pessoas diferentes são denominadas polimorfismos. Na análise do DNA em casos forenses e na determinação de paternidade são usadas sequências com o maior grau de polimorfismo. Esse tipo de investigação baseia-se na análise da herança de uma classe de polimorfismos de DNA conhecidos como Repetições Curtas em Tandem, usualmente com comprimento de 2 a 5 pares de bases, repetidos várias vezes em sequência. O uso intensivo dessa técnica gerou procedimentos que resultaram em

A autenticação e validação das linhagens celulares são fundamentais para a confiabilidade dos resultados das pesquisas que utilizam culturas celulares. Para isso, são utilizados métodos para a identificação precisa da linhagem celular e de possíveis misturas de células de diferentes linhagens. Dentre esses métodos, pode ser citada a análise de isoenzimas que

Em uma cultura celular foi realizado o teste de coloração fluorescente Hoescht 33258, cujo resultado, ao se observar em microscopia de fluorescência, é mostrado a seguir.

Esse resultado indica que a cultura celular investigada

Micoplasmas são microrganismos contaminantes muito comuns em culturas de células, o que pode inviabilizar o trabalho com as linhagens contaminadas. Esses microrganismos são classificados como