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A acurácia da identificação microbiana por MALDI-TOF MS
pode variar dependendo da qualidade dos espectros, da
integridade das bibliotecas e da metodologia analítica
utilizada. Por isso, medidas de validação contínua e
estratégias para aprimorar a sensibilidade e especificidade
dos resultados são essenciais em laboratórios de diagnóstico. É uma estratégia válida para melhorar a acurácia diagnóstica
da identificação microbiana por MALDI-TOF MS:
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No preparo de amostras de colônias bacterianas para análise
direta por MALDI-TOF, as colônias de microrganismos são
misturadas a ácidos e depositadas em placas onde receberão
as misturas de matriz orgânica. Nesse cenário de preparação
de amostras, qual a conduta adequada a ser implementada?
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A espectrometria de massas tipo MALDI-TOF pode ser bastante robusta para identificação de microrganismos, podendo prover uma identificação de amostras de microrganismos desconhecidas ao nível de espécie. Entretanto, há limitações importantes do MALDI-TOF, tais como:
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A identificação de microrganismos, inclusive ao nível de
espécie, usando a espectrometria de massa tipo MALDI-TOF,
apresenta diversas vantagens em relação aos métodos
tradicionais de identificação de microrganismos, sendo a
principal delas a redução do tempo para obtenção dos
resultados para bactérias já conhecidas e cujos espectros
estejam disponíveis nas bibliotecas de espectros do
instrumento utilizado. Assinale a alternativa na qual todos os
métodos mencionados fazem parte do conjunto de métodos
convencionais utilizados para a identificação de
microrganismos.
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Para garantir a correta identificação de microrganismos por
MALDI-TOF, é essencial realizar controles de qualidade
periódicos. Nessas circunstâncias, assinale a alternativa que
descreve corretamente um procedimento de controle de
qualidade.
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Para a correta identificação de microrganismos, é necessário
que o espectro de massa obtido seja de boa qualidade e que
tenha características que permitam a correta análise dos
dados. Qual(is) critério(s) pode(m) levar ao descarte de um
espectro?
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Na identificação de microrganismos usando MALDI-TOF
Biotyper, sistema mais utilizado mundialmente e aprovado
pela agência FDA dos Estados Unidos para análise de
identificação de bactérias e leveduras, o uso de espectros de
referência é fundamental. A obtenção de espectros de
referência, seu uso em análises de identificação de
microrganismos e a inclusão destes em bancos de dados para
catalogação de novos microrganismos em bibliotecas
espectrais fazem parte da rotina de análise, principalmente de
organismos desconhecidos. Nesse contexto, em que consiste
um espectro de massa de referência?
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Para a identificação de um microrganismo desconhecido
usando MALDI-TOF MS Biotyper, vários espectros de massa
são gerados durante a análise da amostra no instrumento e
analisados considerando a frequência, razão massa-carga
(m/z) e intensidade dos picos nos espectros. Os espectros do
microrganismo desconhecido são acumulados, e o espectro
unificado resultante é convertido em uma lista de picos (peak
list) para a análise de identificação. Assinale a alternativa que
indica a etapa de procedimento de análise de dados que
ocorre subsequente à criação de lista de picos para a
identificação de um microrganismo.
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Na identificação de bactérias por MALDI-TOF, um dos fatores
mais relevantes para garantir a qualidade do espectro de
massa adquirido no instrumento é a forma de preparo das
amostras. Assinale a alternativa que apresenta duas
alterações no espectro de massa associadas à baixa
qualidade no preparo de amostras.
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Na análise de identificação de microrganismos por
espectrometria de massas tipo MALDI-TOF, os íons
analisados são formados por um processo específico de
ionização das moléculas de proteínas. Sobre o processo de
ionização que ocorre na técnica MALDI, é correto afirmar:
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