A análise do crescimento microbiano in vitro e a correta recuperação de isolados clínicos ou ambientais exigem o domínio das variáveis físico-químicas e metodológicas dos meios de cultura e das técnicas de semeadura. Com base nos fundamentos da microbiologia analítica e fisiologia bacteriana, analise as assertivas a seguir:

I. Meios de cultura quimicamente definidos (sintéticos) são formulados com concentrações exatas de compostos químicos purificados, sendo adequados para ensaios metabólicos controlados. Em contrapartida, meios complexos contêm peptonas e extratos cuja composição química exata é variável, sendo ideais para suportar o crescimento de microrganismos fastidiosos.

II. As técnicas de semeadura por esgotamento em estrias, espalhamento em superfície e em profundidade possuem como objetivo primário e comum a quantificação absoluta de Unidades Formadoras de Colônias (UFC/mL) da amostra original.

III. O Ágar MacConkey atua como meio seletivo mediante incorporação de sais biliares e cristal violeta, que inibem o crescimento da maioria das bactérias Gram-positivas, e como meio diferencial pela presença de lactose e do indicador de pH vermelho neutro, permitindo a distinção visual de cepas fermentadoras.

IV. Na preparação de placas de Petri com 90 mm de diâmetro para cultivo em meio sólido, padroniza-se o preenchimento até 100% de sua capacidade volumétrica total, aproximadamente 40 a 50 mL. Volumes inferiores causam a rápida dessecação do ágar e depleção nutricional, inviabilizando rotineiramente o cultivo microbiano.

V. O Ágar Sangue é caracterizado como um meio rico e não seletivo, que pode atuar simultaneamente como meio diferencial. Sua formulação permite evidenciar padrões de atividade hemolítica, como a alfa, beta e gama-hemólise, decorrentes da ação de exotoxinas bacterianas específicas (hemolisinas) sobre os eritrócitos íntegros presentes no meio.

Quais estão corretas?