Sobre as tecnologias de sequenciamento de nova geração (NGS), analise as assertivas abaixo e assinale V, se verdadeiras, ou F, se falsas.

( ) As plataformas Illumina e Ion S5 são exemplos de sequenciamento de nova geração, mas se diferenciam no método de detecção da incorporação de nucleotídeos: a plataforma Illumina utiliza fluorescência e o Ion S5 utiliza mudanças de pH.

( ) O sequenciamento de long reads é ideal para a montagem de genomas de novo, pois a capacidade de ler fragmentos de dezenas a centenas de milhares de pares de bases ajuda a resolver regiões complexas e repetitivas.

( ) A reação em cadeia da polimerase é um passo obrigatório para todas as tecnologias de NGS, pois é a única maneira de amplificar o material genético e garantir que haja DNA suficiente para a análise.

( ) O demultiplexing é uma etapa da análise secundária, em que as leituras de cada amostra são separadas em arquivos individuais, o que é fundamental para a análise subsequente.

A ordem correta de preenchimento dos parênteses, de cima para baixo, é:

A eficiência da eletroporação é altamente dependente das propriedades físicas da membrana celular. Em uma comparação entre a transformação de fibroblastos e células dendríticas, observa-se que os fibroblastos são geralmente mais facilmente transfectados. Qual característica intrínseca da membrana plasmática dos fibroblastos é a principal responsável por essa diferença?

Durante um estudo sobre onças-pintadas provenientes de diferentes biomas brasileiros, pesquisadoras realizaram análises genéticas utilizando o sequenciamento de Sanger, com foco no gene Mc1r (receptor de melanocortina 1), envolvido na regulação da coloração da pelagem. O objetivo foi investigar variantes associadas ao melanismo, uma característica adaptativa rara em algumas populações. Ao analisar os dados do eletroferograma, foram observados picos duplos bem definidos em determinadas posições da sequência, sem ruído de fundo ou artefatos instrumentais. Esse resultado sugere

O preparo de bibliotecas genômicas é uma etapa fundamental para o sucesso do sequenciamento, seja ele voltado à análise genômica, transcriptômica ou metagenômica. Cada tipo de amostra requer protocolos específicos de fragmentação, purificação e ligação de adaptadores. A compreensão das diferenças entre esses procedimentos é essencial para interpretar os resultados de experimentos de RNA-seq, metagenômica e NGS em geral. Analise as assertivas abaixo sobre diferentes estratégias empregadas na construção de bibliotecas de DNA e RNA, assinalando V, se verdadeiras, ou F, se falsas.

( ) Na construção de bibliotecas metagenômicas, o DNA obtido de múltiplas espécies precisa ser fragmentado aleatoriamente.

( ) Durante o preparo de bibliotecas de cDNA para RNA-seq, a fragmentação enzimática permite o controle mais preciso do tamanho médio dos fragmentos.

( ) A vantagem de construir uma biblioteca de DNA de fita dupla garante a cobertura de DNA mitocondrial.

( ) Durante a conversão de RNA em cDNA, o uso de transcriptase reversa é fundamental para promover a ligação covalente entre adaptadores e RNA.

( ) Durante o preparo de bibliotecas de RNA-seq, o uso de oligo(dT) serve para selecionar RNA mensageiro por hibridização à cauda poli(A).


A ordem correta de preenchimento dos parênteses, de cima para baixo, é:

Durante a verificação da pureza de amostras de DNA extraídas de folhas de milho, uma pesquisadora decidiu analisar os fragmentos em gel de agarose antes de prosseguir para o sequenciamento. Para garantir a visualização das bandas, adicionou brometo de etídio (EtBr) ao gel, um composto amplamente utilizado em laboratórios de biologia molecular. Com base nesse procedimento, assinale a alternativa correta sobre a função desse reagente na eletroforese.

Durante o planejamento de um experimento de RT-qPCR para avaliar a expressão do gene GAPDH em células humanas, uma pesquisadora observou que um dos pares de primers amplificava tanto o DNA genômico quanto o DNA complementar. Outro par de primers, no entanto, produzia um único produto e ausência de amplificação no controle sem transcriptase reversa (-RT). Conforme os princípios empregados para o desenho de primers para amplificação de DNA complementar, assinale a alternativa correta.

Após a realização de processos de extração do material genético, a análise da razão entre as absorbâncias mensuradas em 260 nm e 280 nm utilizando espectrofotômetro é uma importante etapa de análise. Considerando os dados obtidos nesse processo, assinale a alternativa que indica a interpretação correta.

Durante a purificação de DNA genômico de tecidos vegetais utilizando um kit comercial baseado em colunas de sílica, o pesquisador adiciona uma solução contendo tiocianato de guanidina logo após a lise celular. Essa etapa é crítica para garantir o rendimento e a pureza do DNA, antes da lavagem e eluição final. Com base nas propriedades desse processo, assinale a alternativa correta.

Em biologia molecular, protocolos clássicos de extração utilizando fenol-clorofórmio, a adição de acetato de sódio e etanol é uma etapa crítica após a separação de fases, e tem como principal função

Os telômeros são estruturas localizadas nas extremidades dos cromossomos eucarióticos, compostas por sequências repetitivas ricas em guanina e associadas a proteínas específicas. Sua principal função é preservar a estabilidade do genoma, evitando que as extremidades cromossômicas sejam reconhecidas como quebras de DNA e participem de eventos de recombinação indesejados. Durante sucessivos ciclos de replicação, os telômeros sofrem encurtamento progressivo, levando gradualmente ao estabelecimento do fenótipo de senescência replicativa. Durante a replicação do DNA, o encurtamento progressivo dos telômeros ocorre porque