Estratégias gates são empregadas para analisar dados obtidos pela técnica de citometria de fluxo, permitindo determinar regiões confiáveis a serem analisadas. A figura abaixo é um exemplo ilustrativo. A este respeito é INCORRETO afirmar que:

Na figura ilustrativa abaixo é demonstrada a compensação de fluorescência de dois fluorocromos imaginários (A) e (B). Nesta demonstração o fluorocromo A é medido no canal FL-1 enquanto o fluorocromo B é medido no canal FL-2. Sobre o tópico descrito, considere que: 



I. os fluorocromos possuem um amplo espectro de emissão que pode resultar em sobreposição entre si, quando dois ou mais fluorocromos são empregados para detecção de amostras.

II. a parte descrita em “p” presente na figura indica a proporção de B que se sobrepõe ao canal FL-1.

III. a sobreposição espectral pode ser corrigida subtraindo a fração do sinal fluorocromo A com o sinal do fluorocromo B, ou vice-versa.

IV. a parte descrita em “q” presente na figura indica a proporção de A que entra no Canal FL-2.


Sobre as afirmativas acima, pode-se dizer que:

Em experimentos biológicos, a análise de dados obtida pela técnica de citometria de fluxo tende a ser considerada parâmetros críticos. Sobre este tópico considere que:

I. a análise de dados deve revelar alta seletividade das células avaliadas.

II. o termo “gating” é utilizado nesta técnica e é empregado a uma ou mais regiões combinadas.

III. uma região de análise pode ser definida pelo conjunto de pontos cuidadosamente selecionados pelo usuário, sendo possível determinar também várias regiões no mesmo gráfico.

IV. com uma boa estratégia gating, é possível analisar e eliminar resultados de partículas indesejadas, tais como células mortas e detritos.

Sobre as afirmativas acima, pode-se dizer que:

No uso da técnica de citometria de fluxo e seleção de fluorocromos, considera-se a ocorrência da excitação dos fluorocromos por uma radiação laser ao emitir um comprimento de onda (cor), que é detectado por um sensor, chamado de fotomultiplicadores. Sobre este processo, pode se dizer que:

Os fluorocromos empregados na citometria de fluxo são classificados em vários grupos, incluindo fluorocromos usados para rotular proteínas covalentemente, e fluorocromos para ácidos nucleicos. Sobre o uso de fluorocromos, pode se dizer que:

Células são geralmente coradas com sondas fluorescentes chamadas fluorocromos. Os fluorocromos são capazes de captar a presença de componentes que de outra forma não seriam visíveis. Sobre os princípios técnicos aplicados ao uso de fluorocromos pode se dizer que:

Podem ser consideradas como características metodológicas e/ou conceitos de cell sorting os seguintes itens:

I. a técnica cell sorting é descrita por um processo de identificação e seleção celular em que as células podem ser purificadas de acordo comas diferentes características, tanto a morfologia, e também com base em marcadores.

II. na técnica cell sorting, o princípio base é a deflexão eletrostática de gotículas carregadas, que podem conter células de interesse.

III. na técnica cell sorting, as gotículas carregadas positivamente são desviadas em direção de uma placa de platina de carga negativa, enquanto as gotículas carregadas negativamente são inertes, o que permite a sua coleta em recipientes específicos.

IV. na técnica cell sorting, a deflexão possibilita que células injetadas percorram através de um ponto especifico. A técnica gera a formação de fluxo de gotículas regulares que passam através de um ou mais feixes de laser e que são carregados por um eletrodo de carregamento.


Sobre as afirmativas acima, pode-se dizer que:

Pode ser considerada como características metodológicas aplicadas à técnica de non-sorting flow cytometry:

I. a sua aplicabilidade na pesquisa, diagnóstico clínico e controle de qualidade industrial, permitindo a detecção de atributos celulares, sem a ocorrência de sua separação física.

II. a de não haver a possibilidade de reanálise de células, sendo que, o material após a análise é descartado ao final.

III. a de fornecer dados rápidos sobre a diversidade de populações de células.

IV. a de haver a possibilidade de análise e de reanálise de células, devido ao compartilhamento em ambientes que evitam o descarte celular.


Sobre as afirmativas acima, pode-se dizer que:

Os princípios metodológicos da citometria de fluxo consideram duas principais análises conhecidas, a primeira denominada non-sorting flow cytometry, que determina atributos celulares sem separação física com a dispersão e a emissão de fluorescência, e a segunda denominada sorting flow cytometry, que permite a análise e a purificação de células e partículas, como, por exemplo, o fluorescent activated cell sorters (FACs).

Os FACs permitem a purificação de células marcadas com fluorescência dentre uma concentração de células mistas. Sobre o seu funcionamento considere que:

I. no componente fluídico de um citômetro permite a coleta e transporte amostral, enquanto que o componente óptico proporciona a excitação da partícula/célula, que é conectada a uma rede eletrônica de detectoresligada a um computador.

II. a rede eletrônica detecta o sinal emitido e converte em dados digitais não proporcionais à intensidade da luz que estão conectadas ao software computacional que executa a análise de dados.

III. o processo é baseado na radiação laser direcionada, que excita substâncias fluorescentes presentes nas células, que podem ser compreendidas por interpolação das informações biológicas, moleculares e/ou químicas das células em suspensão.

IV. a citometria de fluxo pode ser empregada em diversas aplicações, seja na detecção de células inteiras, e componentes celulares tais como organelas, núcleos ou moléculas de DNA, RNA.


Sobre as afirmativas acima, pode-se dizer que:

A citometria de fluxo é empregada nas análises das características físicas de célula, como tamanho e granularidade, simultaneamente, à medida que uma célula flui em suspensão através de um equipamento de medição. Sobre esta técnica e os aspectos procedimentais de seu funcionamento, É INCORRETO afirmar que: