SHERLOCK é uma ferramenta de diagnóstico MPOC (“Molecular Point of Care)” baseada em CRISPR para detecção de moléculas únicas de alvos de ácidos nucleicos. Essa metodologia funciona programando enzimas CRISPR-CAS especiais para detectar a presença de uma assinatura específica de ácido nucleico em uma amostra através da detecção direcionada no amplicon. Sobre SHERLOCK é correto afirmar que:

O 6º Padrão Internacional da OMS (Organização Mundial de Saúde) e National Institute for Biological Standards and Control (NIBSC), para RNA do vírus da hepatite C (HCV) para técnicas de amplificação de ácido nucleico (NAT), código NIBSC 18/184, é destinado para a calibração de reagentes de referência secundários contendo plasma de HCV processado em HCV NAT. O padrão compreende de plasma humano liofilizado e HCV. O HCV foi proveniente de uma doação de período de janela positivo para o genótipo 1a do RNA do HCV de alto título. O padrão foi liofilizado em alíquotas de 1,1 mL e armazenado a -20 °C. O material foi calibrado em Unidades Internacionais (UI), em paralelo com o 5º Padrão Internacional da OMS para RNA do HCV para NAT, em colaboração de um estudo envolvendo 19 laboratórios em todo o mundo. Apresentação do painel: 257.000 UI/frasco (5,41 log10 UI/frasco).
Incerteza: a unidade atribuída não carrega uma incerteza associada à sua calibração. A incerteza pode, portanto, ser considerada como sendo a variância do peso do frasco após o enchimento e foi determinada como sendo de +/- 0,19%. Sobre o painel é correto afirmar que:

Atualmente, a PCR em Tempo Real é uma das técnicas mais utilizadas para diferentes diagnósticos e exames como: identifcação de agentes infecciosos, alterações dos cromossomos, determinação de paternidade, genealogia, identificação de pessoas ou amostras, síndromes genéticas, propensão a doenças (testes prediϴ vos) etc. Sobre esta técnica para a fi nalidade diagnóstica é INCORRETO afirmar que:

Em sistemas onde se usa a referência passiva, para uniformizar e normalizar a absorção da fluorescência em toda a placa, o filtro D (≈610 nm) não fica disponível para a reação multiplex. É correto afirmar que:

Diferentes sistemas e fluorescências podem ser utilizados para a técnica de PCR em Tempo Real. Historicamente, o PCR em Tempo Real vem evoluindo em relação a quantidade de filtros e, consequentemente, capacidade de multiplexação de alvos. Neste senϴ do, um pesquisador pretende desenvolver um ensaio pentaplex, sem referência passiva, para diferenciar diferentes patógenos. Visando um ensaio diagnóstico com alta sensibilidade e especificidade, a combinação de fluoróforos viável em relação ao espectro de fluorescência de um equipamento de PCR em tempo Real de 6 canais. É correto afirmar que:

A técnica de amplificação em cadeia da polimerase (PCR) é composta por três etapas: desnaturação da dupla fita de DNA, anelamento dos oligonucleoσ deos e extensão da cadeia. É correto afirmar que:

Durante as últimas décadas, o desenvolvimento de novos insumos e equipamentos permitiram a evolução da PCR convencional para um novo sistema que amplifica e detecta os produtos de PCR em Tempo Real, tornando esta técnica a mais utilizada no momento para o diagnóstico molecular. Sobre a PCR em Tempo Real, uma inovação tecnológica resultante da PCR convencional, é correto afi rmar que:

Para garantir o desempenho de um produto de diagnóstico molecular, se faz necessário o processamento de controles positivo, negativo e interno. Os controles minimizam possíveis erros técnicos, contaminações, resultados falso negativos e falso positivos, além de garantir uma avaliação do desempenho do produto. Caso um produto de diagnóstico molecular possua VLP (“Virus Like Particle”) como controle em sua composição, é correto afi rmar que:

A implementação do Teste de Amplificação de Ácidos Nucléicos (NAT) para triagem em bancos de sangue reduz o risco transfusional de agentes virais como HIV, HCV, HBV entre outros. É correto afirmar que:

As limitações dos métodos de sequenciamento de primeira geração levaram ao desenvolvimento de tecnologias de sequenciamento de nova geração, que são capazes de realizar sequenciamento paralelo massivo de DNA. O sequenciamento de segunda e de terceira geração são denominados: